غیر ملکی ڈی این اے کو بیکٹیریا میں منتقل کرنے کے مختلف طریقے کیا ہیں؟

غیر ملکی ڈی این اے کو میزبان سیل میں منتقل کرنے کے ل there ، مختلف طریقوں کا اطلاق ہوتا ہے۔ قدرتی یا مصنوعی طور پر انسانی مداخلت کے ساتھ جین کی منتقلی کی دو وسیع اقسام ہیں۔

افقی جین کی منتقلی : اس کی تعریف ایک سیل سے دوسرے سیل میں مادے کی منتقلی کے طور پر کی جاسکتی ہے جو والدین کے علاوہ دوسرے سیل سیل میں ہوتی ہے۔

عمودی جین کی منتقلی: اس میں ، جین کی منتقلی والدین سیل کے بیچ بیٹی سیل میں ہوتی ہے۔

HGT [1] میں تبدیلی ، تدوین اور اجتماعیت شامل ہے۔

تبدیلی : ہم گریفتھ کے تجربے اور اس کے بدلتے اصول سے کافی واقف ہیں۔ ننگے ڈی این اے اور بیکٹیریل سسٹم میں اس کا انضمام اگر اس کو اٹک کے طور پر بیان کیا جاسکتا ہے۔ تبدیلی قدرتی طور پر پودوں ، جانوروں اور بیکٹیریا میں دیکھی جاتی ہے۔ تبدیلی مخصوص طریقوں جیسے الیکٹروپوریشن ، بیلسٹک طریقہ ، کیمیائی طریقے وغیرہ پر عمل درآمد مصنوعی طریقے سے کی جاسکتی ہے۔

انتقال [2] : یہ تبدیلی کی طرح ہے۔ Eukaryotic خلیوں کے لئے ، تبدیلی کا لفظ کینسر سے متعلقہ استعمال ہوتا ہے اور اس طرح ، transfication کا لفظ اپنایا جاتا ہے۔ منتقلی کے عمل میں وائرس کو جینیاتی مادے کو یوکریاٹک سسٹم میں منتقل کرنے کے وسط کے طور پر شامل کیا جاتا ہے۔

اجتماعی عمل : یہ بیکٹیریا اور دیگر پراکاریوٹس میں قدرتی طور پر پائے جانے والا عمل ہے جو جنسی پنروتپادن کی سہولت دیتا ہے۔ کنجوجشن کنوجیوشن برج کی تشکیل سے ہوتا ہے جس سے ڈونر سیل (مرد) جینیاتی مواد کو وصول کنندہ سیل (خواتین) میں منتقل کرنے کی اجازت دیتا ہے۔ کنجوجشن پل دو بیکٹیریا کے پِلی (جسے جنسی pili کہتے ہیں) کے ذریعہ تشکیل دیا گیا ہے۔ نوٹ: M13 جیسے بیکٹیریافجز اپنے جینیاتی مواد کو براہ راست بیکٹیریل سیل میں منتقل کرنے کے لئے ان گیلیوں کا استعمال کرتے ہیں۔

خلیوں کو تبدیل کرنے کے لئے جینیاتی انجینئرز اور بائیوٹیکنالوجی کے ذریعہ استعمال ہونے والی تبدیلی کے طریقوں کو وسیع پیمانے پر دو قسموں میں درجہ بندی کیا گیا ہے: جسمانی اور کیمیائی طریقے۔

1) کیمیائی طریقے:

CaCl2 علاج: CaCl2 سیل جھلی کو غیر مستحکم کرے گا۔ یہ ڈی این اے سے جکڑے گا اور فاسفیٹ کے منفی چارج کا احاطہ کرے گا۔ لہذا ، ڈی این اے لیپڈ بیلیئر کے ذریعہ آسانی سے سیل میں داخل ہوسکتا ہے۔ CaCl2 لپڈ جھلی کے بیرونی مرحلے پر ڈی این اے کو تیز تر کرنے کا سبب بنتا ہے۔ نمی پر ہیٹ شاک (42 ° C) کے تابع کرنے سے ٹرانسفارمینٹس کی پیداوار میں اضافہ ہوتا ہے۔

پی ای جی کا علاج: پودوں کے خلیوں کے ل we ، ہم سی ای سی 2 کے بجائے پی ای جی کا استعمال کرتے ہیں۔ پی ای جی 4000 ڈا انو ہے اور یہ جھلی کو غیر مستحکم کرتا ہے اور ڈی این اے کے ساتھ ایک پیچیدہ بناتا ہے۔ اس کے بعد ڈی این اے آسانی سے سیل میں لے جایا جاتا ہے۔

دیگر کیمیائی طریقوں میں DEAE dextrans ، Liposomes ، nanocarrier وغیرہ کا استعمال شامل ہے۔

2) جسمانی طریقے:

الیکٹروپوریشن: اس میں جھلی میں عارضی طور پر سوراخ پیدا کرنے کے لئے برقی پلس کا استعمال شامل ہے۔ چھوٹے پلازمیڈز اور ڈی این اے آسانی سے کیمیائی طریقوں کے استعمال سے شامل ہوسکتے ہیں ، لیکن ڈی این اے کے بڑے انووں کے ل we ، ہمیں جسمانی طریقوں کو استعمال کرنے کی ضرورت ہے۔ تاہم ، الیکٹروپوریشن کے لئے ، حراستی زیادہ ہونا چاہئے۔ پودوں کے خلیوں کی صورت میں ، سیل پولیساکریڈس اور دیگر بائیو مالیکولز جیسے ہیمسیلوولوز ، سیلولوز ، پیکٹین وغیرہ کی پرتوں سے گھرا ہوا ہے ، اس طرح ہم خلیوں کو دیوار کو ہٹانے اور سیل میں تبدیل کرنے کے ل he ہیمسیلوولوز اور سیلولوز جیسے خامروں سے سیل کا علاج کرتے ہیں۔ ایک پروٹوپلاسٹ اس طرح ، جھلی میں چھیدوں کو آسانی سے تشکیل دیا جاسکتا ہے اور ڈی این اے کو الیکٹرو پورشن کے ذریعے سیل میں منتقل کیا جاسکتا ہے۔

http://www.scientzbio.com/s/

حیاتیاتی طریقہ [4] : اسے ذرہ بمباری کا طریقہ کار ، ذرہ بندوق کا طریقہ ، یا محض جین گن بھی کہا جاتا ہے۔ اس آلے میں مائکرو کیریئرس پر مشتمل ہوتا ہے جو بھاری دھاتوں سے بنا ہوتا ہے جیسے آو ، اگ ، ڈبلیو وغیرہ۔ بندوق میں ٹوٹنا ڈسک بھی ہوتا ہے ، ایک پلیٹ جو مائکرو کیریئرز (ڈی این اے سے لدی ہوئی) ، رکنے والی پلیٹ ، اور آخر میں سیل ہولڈنگ پلیٹ پر مشتمل ہوتی ہے . جب بندوق داغی جاتی ہے تو ، گیس کو بندوق میں دبایا جاتا ہے جس سے ٹوٹ جانے والی ڈسک ٹوٹ جاتی ہے۔ مائکرو کاریر (ڈی این اے کے ساتھ) والی پلیٹ رکنے والی پلیٹ کی طرف بڑھتی ہے۔ اس کے بعد مائکرو کاریر سیل میں داخل ہوکر داخل ہوتا تھا۔ اس طرح ڈی این اے براہ راست سیل میں منتقل ہوتا ہے۔ تاہم ، جین گن کے استعمال کی کچھ حدود ہیں۔ متعدد ذرات داخل ہونے اور اس کے جمع ہونے کا امکان ہے جو جین یا جین کے خاموشی ختم ہونے کا سبب بن سکتا ہے۔

http://www.scientzbio.com/gene-transduction-device/

مائکروجنجیکشنس : وہ ڈی این اے کے انووں کو براہ راست خلیے کے مرکز میں تبدیل کرنے کے لئے انجیکشن لگانے کے لئے بہت عمدہ پائپائٹ کا استعمال کرتے ہیں۔ یہ پودوں اور جانوروں کے خلیوں کے لئے استعمال ہوتا ہے۔

نوٹ: اگر آپ کا ڈیٹا غیر متعلقہ ہے تو میں آپ کی اصلاحات اور مشوروں کی تعریف کروں گا۔

حوالہ اور مزید پڑھیں

براؤن ، ٹی اے ، 2016. جین کلوننگ اور ڈی این اے تجزیہ: ایک تعارف۔ جان ولی اور سنز۔

وولف ، جے اے ، مالون ، آر ڈبلیو ، ولیمز ، پی۔ چونگ ، ڈبلیو ، اکسیڈی ، جی ، جانی ، اے اور فیلنگر ، پی ایل ، 1990۔ وایو میں ماؤس کے پٹھوں میں براہ راست جین کی منتقلی۔ سائنس ، 247 (4949 Pt 1) ، پی پی 14465-1468۔

لورینز ، ایم جی اور ویکرنجیل ، ڈبلیو ، 1994. ماحول میں قدرتی جینیاتی تبدیلی کے ذریعہ بیکٹیریل جین کی منتقلی۔ مائکروبیولوجیکل جائزہ ، 58 (3) ، پی پی 563-602۔

لورکن ، PF ، 1997. الیکٹروپورٹی کے ذریعہ جین کی منتقلی