جین بندوق کا استعمال کیسے کریں

1. مواد کی تیاری

درمیانے درجے کی ایک پتلی پرت 9 سینٹی میٹر 2 ثقافت ڈش پر رکھی گئی تھی، اور مواد (عام طور پر غیر معمولی کوریائی، بالغ کوریائی، چھوٹے کالس، معطلی خلیوں، پروٹوپلاسٹ وغیرہ وغیرہ) ڈش کے مرکز میں 3 سینٹی میٹر کے قطرے کے ساتھ چڑھایا گیا تھا. .

2، سونے کے پاؤڈر کا علاج

ایک سینٹرکریٹج ٹیوب میں 60 ملی گرام سونے کا پاؤڈر یا ٹانگسٹن پاؤڈر لے لو، 1 ملی میٹر مطلق ایتھنول شامل کریں، 3 منٹ کے لئے اچھی طرح ہلائیں، 9615 گرام پر 1 کروڑ کے لئے سینٹرکٹرجج کو نکالیں، سرنیٹینٹ کو ہٹا دیں، 1 ملی میٹر کا نسبتا پانی اور 9615 گرام پر سنتریجھنجھنجھنج کریں. ٹائمز. بالآخر، سونے کے پاؤڈر 1 ملی میٹر کا نسبتا آستین پانی میں معطل اور 4 'C یا کمرے کے درجہ حرارت پر محفوظ کیا گیا تھا.

3، ڈی این اے پروسیسنگ

50 ٹی اے سونے کا پاؤڈر معطل کریں، 5 ویں پلاسمڈ ڈی این اے (1.0 / lg ~ 1) حل، 50 // ایل شامل کریں.

0.1 mol / L spermidine (استعمال کیا جاتا حل کا نسب نسبتا تھا)، 3 منٹ کے لئے ہلکا ہوا، 10 منٹ کے لئے کمرے کے درجہ حرارت پر چھوڑ دیا گیا، 10 9 کے لئے 9615 جی پر سنفرافیجورڈ، سرنیاتٹ کو چھوڑ کر؛ 250 ~ 1 مطلق ایتھنول شامل کریں، 10 10 کے لئے 9615 جی پر سینٹرائڈروجج کریں اور سرطاتھن کو چھوڑ دیں. یہ گولی 60/1 1 مطلق ایتھنول میں دوبارہ رکھی گئی تھی اور 5 شاٹس (10 سے 1 فی شاٹ) کے لئے استعمال کیا جاتا تھا.

4، جین گن کی کارروائی

جین گن کے تمام آپریشنوں کو اسپیڈک حالات کے تحت انجام دیا جاتا ہے، جیسا کہ مندرجہ ذیل ہے:

1) 70٪ ایتھنول کے ساتھ جینی گن اور نمونہ کے چیمبر کی سطح کو ناپاک کریں. ایک ہی وقت میں، رکاوٹ خالص اور صاف ترین ڈسک، مائکرو لچکدار کیریئر، اس کے حامل اور فکسنگ کا آلہ 15 منٹ کے لئے 70٪ ایتھنول کے ساتھ لینا پڑا، اور پھر خشک کرنے کے لئے ایک صاف بنچ پر رکھ دیا گیا. واضح ڈایافرام، فکسڈ کور، اور مائکرو لچکدار کیریئر شروع کرنے کے آلے کو 70٪ ایتھنول کے ساتھ سطح پر نسبتا اور خشک پھیلایا جا سکتا ہے.

2) برقرار رکھنے کی انگوٹی میں مائکروپروٹیکل سلائڈ داخل کریں اور مائکروپٹوٹیکل سلائڈ کے مرکز میں ڈی این اے اور سونے کے پاؤڈر کا مرکب اور تقریبا 1 منٹ کے لئے خشک کریں.

3) اس ہولڈر پر بکھرے ہوئے جھلی کو انسٹال کریں اور اسے گیس تیز رفتار سے گھڑی سے گھڑی دیں.

4) خلائی انگوٹی کو انسٹال کریں، خالی کرنے والی خالص، روک تھام خالص ہولڈر، ذرہ کیریئر اور فکسنگ کی انگوٹی (ذرات کے چہرے کا سامنا کرنا پڑتا ہے)، کور کو مضبوط بنانے اور پکڑنے میں ڈالیں.

5) نمکین کو بمباری کے چیمبر میں رکھیں اور دروازے کو بند کریں.

6) ہیلیم سلنڈر کے اہم والو کو کھولیں اور ہیلیوم ریگولیٹر والو کو گھڑی گھومائیں تاکہ دباؤ گیج پوائنٹر کا اشارہ ڈایافرام دباؤ 200 پی ایس (= 1.379 میگاواٹ) سے کہیں زیادہ ہے.

7) جین بندوق اور ٹرانسفارمر سوئچ کو تبدیل کریں.

8) ویکیوم بٹن دبائیں. جب خلا 26-28in ہگ (= 88.05 ~ 94.82 کلومیٹر) ہے تو، جلدی ہولڈ بٹن پر دبائیں، پھر لانچ کے بٹن کو دبائیں اور پکڑو اور اسے فعال نہ ہونے تک رکھیں.

9) ویکیوم ٹیبل صفر ہو گئی ہے کے بعد نمونے کو دوبارہ ترتیب دینے کے لئے وین کلی کی دبائیں.

10) بند کرو.

ہیلیم سلنڈر کے اہم سوئچ کو سخت کریں، خالی بندوق کو مار ڈالو، دباؤ گیج کے پوائنٹر صفر پر لوٹ جائیں، پھر دباؤ گیج ایڈجسٹمنٹ وال گھڑی کو گھومنے دیں؛ جین بندوق اور ٹرانسفارمر سوئچ کے اہم سوئچ کو بند کردیں.